细胞浓度选对了吗？简单说就是让细胞在培养皿里刚好铺满但不多。比如传代5次的细胞用1e5到1e6个/毫升最合适，传代10次的细胞可以少到5e4个/毫升。铺太厚了会互相挤死，铺太薄了实验数据波动大。

为什么是这个答案呢？因为细胞增殖能力跟传代次数有关，传代越多细胞越健康，需要的浓度就越低。实验数据显示传代5次的细胞在1e5浓度下贴壁率90%，传代10次的细胞在5e4浓度下贴壁率85%。铺太厚的话比如1e7个/毫升，细胞死亡比例会飙升到40%以上（数据来源《细胞培养技术手册》2021）。不同实验需求也有区别，比如做流式细胞术需要1e6浓度确保统计量，而单细胞测序可能只要5e3浓度。但不管哪种情况，铺满培养皿边缘就是最佳状态，这时候细胞分布均匀，后续实验结果波动控制在10%以内。