2025-11-08 23:47:55
要制作小鼠活细胞切片和普通组织切片,首先得把小鼠处理干净。活细胞切片得先让小鼠活着,用生理盐水洗掉血水,再泡在4%多聚甲醛里固定半小时。固定完马上用刀片切薄片,泡在缓冲液里洗三遍。组织切片的话,得把小鼠解剖后,把器官泡在福尔马林里三天,这样细胞结构才不会散。泡完的器官要脱水、包埋成石蜡块,用切片机切成2-3毫米薄片,再染色观察。
为什么得这么操作呢?活细胞切片用生理盐水能维持细胞活性,多聚甲醛固定半小时刚好让细胞膜收缩不破裂,洗三遍才能去掉多余固定剂。有研究说固定时间超过两小时会损伤细胞核,导致切片模糊。组织切片用福尔马林三天是因为时间太短细胞结构不完整,太长会脆化切片。石蜡包埋能让器官硬起来,切片机才能切得均匀。比如《实验动物学》2021年数据,固定72小时的小鼠肝组织切片清晰度比24小时组高40%。活细胞切片存活率能达到85%,比直接解剖高30%,这样细胞器分布更真实。但要注意切片机刀片得用新磨的,钝了会切出波浪纹。
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