AO染液主要是让细胞核变红，aopi染料是让线粒体变绿，配置比例1:1，浓度5%。混合后静置十分钟，就能看到细胞核和线粒体分开显示。比如在观察植物细胞时，先滴一滴染液在载玻片上，再用碘液固定细胞结构，这样染色效果更明显。

为什么这样配呢？因为AO染料和aopi染料都是酸性染料，浓度太高会直接烧坏细胞膜。实验数据证明，浓度超过7%的话，细胞存活率会从95%掉到60%以下（2020年《细胞生物学实验手册》）。1:1比例是经过反复测试的，太浓会结块，太稀染不均匀。比如用5%浓度时，线粒体绿得透亮，核膜红得发亮，刚好形成对比色。静置时间不能太长，超过十五分钟细胞会皱缩变形，影响观察。所以先混合染液，等三分钟让染料初步渗透，再静置七分钟让结构更清晰。这种分阶段操作既能保证染色效果，又能减少细胞损伤。