礼品代发网

礼品代发网

收录130107113题,礼品代发网免费搜题解答

今日已更新0道题

如何把WB条带跑得干净漂亮-wb条带位置

2025-11-08 23:48:17  

如何把WB条带跑得干净漂亮-wb条带位置

优质解答

跑胶前要准备好琼脂糖凝胶浓度,浓度最好在0.8%到1%之间;上样量别太多,每个孔加5-10μL就行;电泳时间别太短,跑完胶条带要跑到胶底部;用EB染色或者考马斯亮蓝染色,条带颜色要深浅均匀。

为什么这么操作呢?首先浓度太低胶会太软,跑胶时条带容易变形,实验数据表明0.6%凝胶条带拖尾概率比0.8%高30%;上样量超过10μL会使条带变宽,文献显示5μg/cm²的上样量能保证清晰度;电泳时间不足会导致Rf值不达标,比如跑60分钟SDS-PAGE的Rf值偏差会扩大到±0.15;正确染色能让条带对比度提高50%,比如用TBST洗3次每次5分钟,能减少背景噪音。跑胶时条带位置在目的条带附近就说明跑好了,比如目的蛋白在85kDa附近出现条带,说明电泳条件合适。

本题链接:

WB条带位置跑胶技巧