想得到基因的CDNA序列，得先从细胞里提取RNA。然后用特殊酶把RNA转成CDNA，这个叫反转录。接着用引物把目标基因在CDNA上扩增出来，用电泳看有没有目标条带。整个过程大概分三步走。

这是因为CDNA是DNA的副本，而基因在细胞里是以RNA形式存在的。比如人类细胞里的mRNA就是基因表达的产品，但mRNA容易降解。所以得先提取新鲜细胞里的RNA，再用逆转录酶（比如T7 RNA聚合酶）把RNA链连接到DNA引物上，形成互补链，这样就能得到CDNA。根据《分子生物学原理》数据，逆转录酶的效率能达到95%以上，但可能漏掉5%的RNA片段。扩增时用特异性引物，像新冠病毒的S蛋白基因扩增，引物设计准确率要超过98%才不会出错。电泳验证时，用GelRed染色剂看条带，条带大小和预期一致才说明成功。整个过程需要严格控温，比如逆转录在42℃、扩增在94℃-72℃循环，否则容易出错。