安瓿管保存菌种主要用高压蒸汽灭菌法，先把安瓿管和菌种混合液装进灭菌锅，开大火加热到121℃保持15到30分钟，等压力表指针到0.21到0.23兆帕时关火降温。冷却后倒置放培养箱，等彻底冷却再封口。

为什么这样做呢？高压蒸汽能穿透玻璃杀死所有微生物，121℃是灭菌标准温度，15分钟足够灭活常见杂菌，压力0.21-0.23兆帕能保证灭菌均匀。比如《微生物学实验手册》说，121℃下30分钟灭菌效率达99.9%，而100℃只能灭活部分耐热菌。冷却倒置是为了让冷凝水均匀分布，避免局部积水影响封口质量。装液量控制在安瓿管2/3处，留出膨胀空间，否则高温下液体膨胀会胀破安瓿。封口要用熔封法或火焰密封，确保无菌环境。实验数据显示，正确灭菌的菌种保存期可达2年，灭菌不彻底的话3个月就会污染。