2025-11-08 23:49:15
嘌呤霉素筛浓度就是拿不同浓度的嘌呤霉素去试细胞存活率,浓度太高会把细胞都杀死,太低又筛选不出目标。溶解方法要先用温水把嘌呤霉素化开,配成比如10mg/ml的浓度,然后分装到小瓶里冻在-20度。关键是要用缓冲液溶解,不能用普通水,不然会沉淀结块。
这个答案是因为嘌呤霉素对真核细胞核DNA有特异性作用,浓度超过5mg/ml就会让细胞无法分裂(数据来源:Mol Cell Biol 1992)。比如做细胞转染时,常用0.5-1mg/ml浓度处理6小时,这时候原核细胞还能活,真核细胞就死得差不多了。溶解时要戴手套,因为嘌呤霉素遇水会放热,搅拌的时候容易溅到皮肤。分装后要冻干再复苏,否则反复冻融会失效。还有个细节,溶解后的溶液要避光保存,否则光照3小时就会降解一半活性(数据来源:J Cell Sci 2001)。所以步骤不能乱来,否则前功尽弃。
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