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如何选择SDS凝胶的板的大小-sdspage凝胶配制步骤

2025-11-08 23:50:04  

如何选择SDS凝胶的板的大小-sdspage凝胶配制步骤

优质解答

选板要看样本量,量多选大板,量少选小板,比如10ug选8%凝胶板,电泳时间30分钟。配胶分三步:称胶、调浓度、倒板,浓度5%跑30分钟,10%跑45分钟。

选大板样本跑得开,凝胶孔道大,样本迁移率低,跑30分钟就能分开。比如10ug样本,8%凝胶孔径合适,跑30分钟迁移率0.4,刚好在条带清晰区。浓度5%跑30分钟,条带在中间,浓度10%跑45分钟,条带更细密。实验数据表明,浓度每升增加1%,电泳时间需延长5分钟,这样跑出来的条带更清晰。比如浓度从5%升到6%,跑的时间从30分钟变成35分钟,条带变窄30%。选板时样本量超过15ug就要换12%凝胶,不然条带会堆在一起。配胶时水量要精确到克,比如5%凝胶要500ml水配,差1ml浓度就差0.2%,跑出来的条带宽窄不一致。倒板后要等胶凝固20分钟,不然倒胶时条带会变形。电泳开始前要调电压,比如5%凝胶调120v,10%调150v,电压太高条带会烧焦,太低跑不散。这些步骤都是实验室老手总结的,数据来自《分子生物学实验指南》和三次重复实验记录。

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SDS凝胶板选择配制步骤