2025-11-08 23:50:13
电泳图里那个小条条就是marker,它本身是已知分子量的DNA片段。跑完电泳后,把样本条带和marker条带对比,就能知道样本DNA大概有多大。比如看一个1.5kb的质粒,跑出来的条带位置和marker里1.5kb那条对齐,就知道这个质粒没碎掉。要是条带跑到比marker的1kb条带还往下,说明可能有降解。
为什么得用marker呢?因为电泳迁移率和DNA分子量不是线性的,但marker是提前跑过很多不同大小的DNA,画好了标准曲线。根据迁移距离除以迁移时间(Rf值),就能算出对应分子量。比如1%琼脂糖凝胶里,1kb的DNARf值约0.7,2kb的约0.5,这个数据来自《分子克隆实验指南》第3版。实际操作时,如果样本条带和marker的1.8kb条带位置差超过0.2Rf值,就需要重新跑胶或者检查电压设置。上次实验有个同学把marker当样本跑,结果全实验室的数据都标错了,后来发现是因为没放marker在胶上,直接放样本条带进去,导致对照缺失。所以跑电泳前必须确认marker位置正确,跑完先看marker条带再分析样本,这个顺序不能乱。
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