铺板的时候要记住每个孔不能太稀也不能太稠太稀的话细胞长不牢太稠的话会挤死所以一般推荐每孔1万到3万细胞贴壁细胞可能需要多放比如2万到4万悬浮细胞可以少放1万到3万具体看细胞类型传代次数和实验目的比如做增殖实验可以多放传代第3代的可以少放因为有文献说这样细胞活率更高铺板后要放培养箱里培养12到24小时观察有没有死掉太多

铺板数量要根据细胞类型和实验目的来定比如贴壁细胞需要更多空间生长悬浮细胞可以挤一点有文献显示贴壁细胞每孔2万到4万细胞时传代3次以上的细胞成活率能达到85%以上悬浮细胞1万到3万时传代2次以上的细胞成活率也能到80%以上但铺太多比如超过5万细胞的话死得特别快可能只有50%能活这是因为细胞之间会互相挤死或者营养不够这时候就需要调整铺板数量了比如做增殖实验可以铺3万到4万细胞做检测的话铺1万到2万就够用另外铺板的时候要均匀分布不能有的孔多有的孔少否则后续实验数据会出问题比如贴壁细胞铺得少可能贴不牢铺得太多可能长成团块影响观察还有个关键点就是铺板后要放培养箱里培养12到24小时再观察细胞状态如果发现死得太多就需要减少铺板数量如果发现长得太慢就需要增加铺板数量或者换更高代次的细胞