建库浓度一般20到50纳克每微升算合格，太低测序容易断条，太高容易占满芯片。比如20ng/ul以下可能得重做，50以上可能得稀释。

建库浓度为什么是这个数啊？因为测序仪吃进去的DNA量要刚好够用。比如Illumina的指南说，50ng/ul的浓度建库后每孔得有1.5微升，这样200孔的芯片总共消耗100微升。假设建库反应消耗30%的DNA，那原始浓度至少得50/0.7≈71ng/ul，但实际操作要留余量，所以控制在20-50之间。有研究显示浓度低于20时，测序深度会掉到80%以下，高于50的话错误率会翻倍。还有个关键点，建库试剂对浓度敏感，比如磁珠法在30-40ng/ul时活性最高，太低反应不完全，太高容易堵塞通道。就像煮面条，水太少面煮不熟，太多面又黏锅底，浓度也是这个理儿。