稳转细胞株就是让细胞长期记住要表达的基因。做法是先用病毒或质粒把目的基因送进细胞核，再用抗生素筛选出能持续表达的细胞。比如用G418抗生素筛选时，只有5%的细胞能活下来并且持续输出目标蛋白。

为什么是这个答案呢？因为病毒感染效率高，比如腺病毒转染效率可达30%-50%，但需要担心病毒残留。质粒转染虽然安全，但转染后只有5%-10%的细胞能被抗生素筛选出来。研究显示（Nature Cell Biology 2018），用慢病毒载体构建的HEK293细胞株，在G418筛选后存活率约8%，且稳定表达时间超过6个月。关键步骤是筛选，因为普通细胞培养3个月后表达会消失，而经过筛选的细胞能维持表达。比如用pCDNA3.1质粒转染后，用300μg/mL G418筛选14天，只有3%-5%的细胞能持续表达绿色荧光蛋白。所以必须通过抗生素压力筛选出真正携带目的基因的细胞，才能保证长期稳定。