细胞铺板最少得等24小时再转染一次。铺板后要等细胞贴壁长到60%-70%密度才能转染，这样转染效率高。转染后要等细胞长到60%铺板密度再下次转染，中间间隔至少24小时。铺板太早细胞没长好，转染时容易死；间隔太短细胞长不够，转染效果差。

为什么得等24小时呢？因为转染试剂需要时间让细胞吸收。根据《细胞培养技术手册》数据，铺板后24小时细胞密度才够，这时候转染成活率能到85%以上。如果铺板后12小时就转染，细胞只长到30%密度，成活率会掉到60%左右。转染后必须等24小时让细胞恢复，这时候细胞密度又涨到60%-70%，才能安全进行下一次转染。实验记录显示，间隔不足20小时的话，转染后细胞会大量死亡，甚至铺板都长不好。所以间隔时间不能少，但也不能超过48小时，超过的话细胞会过度拥挤，影响后续实验效果。