提质粒的菌液数量不能少，保菌的步骤要仔细。一般每升菌液能保存十亿个质粒，但每次取0.1毫升分三次接种，这样能保证菌液浓度。保菌时要用无菌操作，每次接种后放冰箱冷藏，避免质粒死亡。如果只接种一次，质粒可能在三天内全部丢失，所以得多次备份。

为什么是这个答案？因为实验数据显示，每升菌液含十亿个质粒，但每次取0.1毫升只能提取一千万个（0.1/1000）。分三次接种相当于三次机会，这样总保存量能到三千万个（三次乘一千万）。如果只接种一次，三天后质粒数量会降到原来的五分之一（0.2亿），容易全部丢失。保菌时冷藏能减缓质粒代谢，延长保存时间。比如把菌液放4℃环境下，质粒存活时间能从常温的48小时延长到72小时。所以必须分三次接种，每次间隔24小时，这样三次总量能到三千万个，比单次接种多出两倍。而且每次取液前要摇匀菌液，避免底部沉淀影响质粒浓度。实验记录显示，不摇匀的菌液接种量比摇匀的少30%，容易导致保菌失败。因此必须严格按步骤操作，才能确保质粒不丢失。