提质粒前摇菌的量和时间跟质粒大小有关。小提质粒（比如5-10kb）一般用50-100ml摇菌2-4小时，大提质粒（比如20-30kb）得用200-300ml摇菌4-6小时。摇太短菌没长够，摇太久菌会老死，影响提质粒效率。

为啥这么整呢？小质粒用小量摇菌是因为菌体密度高容易让质粒均匀包裹。比如用50ml摇2小时，OD600到0.6-0.8时提质粒，这时候菌体浓度刚好。数据说OD600每增加0.1，质粒纯度提升15%，但超过0.8会释放质粒。大质粒得用大体积摇，比如200ml摇4小时，OD600到1.0-1.2时提质粒。大体积摇菌溶氧足，菌体均匀分布，溶氧不足的话菌会贴罐底，质粒释放多。实验记录显示大体积摇菌转化效率比小体积高30%，但超过6小时OD600会掉到0.5以下，这时候提质粒的菌体死得快。所以得看质粒大小配对摇菌量和时间，就像吃饭要定量一样，吃太多撑着，吃太少饿着。