一般加半到一毫升氯仿摇匀后静置五分钟然后离心。这时候氯仿会跟RNA样本分两层，上层是含有RNA的水相层，下层是氯仿和杂质。静置时间不能太短否则分层不彻底，也不能太长容易让RNA被破坏。

氯仿主要是起什么作用呢，它能让细胞膜破裂把RNA释放出来，同时把蛋白质沉淀。比如文献里说静置五分钟能让有机相和水相分得清清楚楚，这时候离心力会把下层氯仿甩到底部。如果加太多氯仿比如两毫升，摇匀时间超过十分钟反而会破坏RNA结构。就像我上次实验加多了，结果RNA浓度掉了一半，离心后还混着白絮絮的东西。所以按照常规操作加半到一毫升，静置五分钟最合适，这样既省试剂又保证提取质量。