调荧光亮度主要看四个参数：光圈、物镜、增益和衰减器。光圈调大让更多光进镜头，物镜选高数值（比如NA0.5比0.3多进30%光），增益调到100左右最合适，衰减器调20-30dB能平衡过曝。调的时候先改光圈和物镜，不行再调增益，用衰减器防止太亮。

为什么这样调？因为光圈每小一级光强减半，比如从F2.0到F2.8就少一半光。高数值物镜（NA0.5）比普通物镜（NA0.3）多进30%光，这是显微镜说明书写的。增益调到100是怕太高让信号失真，衰减器调20dB能让图像不糊成一片，实验室数据显示衰减器每调10dB光强降1/10。先改硬件参数再调软件参数，就像先吃饭再喝汤，顺序不能乱。