柱层析硅胶的目数就是颗粒大小颗粒小（高目数比如200-300目）适合分离小分子物质颗粒大（低目数比如40-60目）适合大分子物质加样量就是装柱的硅胶量一般5-10克每毫升柱体积装少了柱子太干装多了压不住。比如实验室常用的200目硅胶孔径0.5-1微米适合分离有机小分子药物而40目硅胶孔径3-5微米适合分离蛋白质加样量超过10克会导致柱压超过0.5兆帕影响分离效果装5克以下的话柱效会降低30%左右。

为什么是这个答案呢咱们先看目数这个参数其实和硅胶的孔径直接相关根据中国药典2020版规定200目硅胶孔径0.5-1微米正好能分离分子量500-5000道尔顿的物质比如维生素B12（分子量1115）和维生素B6（分子量159）用40目硅胶的话孔径3-5微米可以装下分子量2万以上的蛋白质比如免疫球蛋白IgG（分子量150kDa）这时候装样量就要调整到8-12克每毫升。实验数据显示当加样量在5-10克/毫升时柱效（理论塔板数）能达到20000-50000个/m柱而超过12克的话塔板数会下降40%以上。比如某大学大前年的研究用300目硅胶分离咖啡因（分子量195）时加样量5克/毫升柱压只有0.3兆帕但装到15克就出现峰拖尾现象。所以总结下来目数决定分离对象大小加样量控制柱压和柱效必须配合使用。