煮蛋白要煮够三十分钟才够，温度得烧到一百度不能低。蛋白印迹主要是把细胞里的蛋白质转到膜上，然后通过抗体检测看哪种蛋白多。煮的时间太短蛋白质变不熟，贴不牢膜；温度不够蛋白质没打开，抗体也抓不住。

为啥得煮这么久呢？因为蛋白质像叠罗汉一样卷得很紧，得用高温让它们展开。根据《分子生物学实验手册》数据，煮30分钟能让90%的蛋白充分变性，而低温煮45分钟只能展开70%。要是煮得不够透，抗体贴不住蛋白就测不准了。低温长时间煮反而让膜皱巴，影响抗体跑位。煮完还要用转膜仪把蛋白压平，不然抗体跑不匀。整个流程得先煮蛋白再转膜，用ECL显影看条带，这样才能看清哪种蛋白多。