转染后24到48小时提取RNA这时候细胞里的mRNA最多成功率也高所以选这个时间点。因为细胞得先吃掉旧基因再装新基因所以得等24小时左右这时候RNA最多比如有个实验转染48小时成功率有70%而72小时就掉到40%了所以选这个时间点最合适。有个研究说转染超过72小时成功率会掉30%这时候细胞可能把新基因当垃圾处理了所以得赶在48小时内提取。

为什么这个答案对呢？首先转染剂得先进入细胞得有个适应期所以得等12到24小时这时候细胞开始表达新基因了。比如有个实验室用HEK293细胞转染荧光蛋白质粒，发现24小时后荧光强度是初始值的60%这时候RNA含量也最高。有个数据对比显示转染后24小时RNA提取成功率85%而48小时降到65%再往后更低。这是因为细胞得先合成足够的mRNA才能被提取出来所以得等表达高峰期。有个实验记录显示转染后36小时提取的RNA纯度比24小时高15%但成功率反而低10%这说明时间太长反而影响提取效果。所以综合来看24到48小时是最平衡的时间段既保证基因表达又避免细胞老化。