提前2-3天接种细胞，转染前换液。转染时细胞密度要适中，太稠或太稀都不行。换液能洗掉旧营养液，让细胞吃上新鲜培养基，转染效率更高。

为什么这么操作？首先细胞提前接种是为了让它们长到合适密度，比如80%-90%汇合率。转染前换液是因为旧培养基里代谢废物多，会干扰转染试剂作用。实验数据显示，换液后转染效率比不换液高30%（来源：《分子细胞生物学》2021）。另外换液还能减少杂菌污染风险，特别是用青霉素抗生素时。如果细胞没换液直接转染，转染率可能从60%降到40%以下。要等细胞贴壁牢固再转染，否则掉到液面会降低效率。