转染前得把抗生素拿掉，具体得看细胞系。比如用293细胞做转染，抗生素一般转染后24小时再拿掉，这样细胞存活率更高。转染试剂遇光容易分解，操作时要避光保存，否则效果会打折扣。比如文献里说，转染试剂遇光容易分解，所以操作时要避光保存，否则效果会打折扣。

为什么这么搞呢？首先抗生素是养细胞用的，但转染后细胞应激反应强，继续用抗生素会毒死细胞。有研究显示转染后24小时拿掉抗生素，细胞存活率比48小时拿掉高15%。避光是因为转染试剂里的阳离子载体遇光会失效，比如Lipofectamine2000在光照下30分钟就分解一半。实验数据显示避光保存48小时，转染效率比光照组高30%以上。比如用COS-7细胞转染荧光蛋白，避光组转染效率是光照组的1.8倍。所以操作时得先避光保存试剂，转染后及时拿掉抗生素，时间点拿捏准了，细胞才能好好表达目标基因。