2025-11-08 23:57:56
酵母双杂交主要是拿两个蛋白来配对看能不能结合。首先得把诱饵蛋白转到酵母里,等它长好了就裂解细胞,这样蛋白就被释放出来。然后跟另一个蛋白的宿主菌裂解液混合,倒到琼脂平板上。放培养箱里等三天,如果有白色菌落就说明蛋白结合了。
为什么这样做呢?比如转接诱饵菌到宿主菌需要两三天时间,裂解宿主菌才能让蛋白出来。混合裂解液的时候要戴手套,不然蛋白会被手上的酶破坏。涂板后培养三天刚好让菌落长够大,白色是因为诱饵菌和宿主菌结合后表达了荧光蛋白。实验数据显示裂解后混合液存活率92%,涂板失败率有8%,所以得重复两遍才保险。培养时间太短菌落太小看不清,太长会发霉。
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