液相色谱柱主要是用来分离混合物里的不同成分的，就像用筛子筛出不同大小的颗粒一样。它需要用到酸来控制溶液的酸碱度，这样可以让样品中的成分更清晰地分开。常用的酸有磷酸、醋酸这些，浓度一般在0.1到1mol/L之间，具体要看分离什么物质。

很多情况下选磷酸是因为它稳定，而且能和样品中的碱性物质反应。比如分离氨基酸时，pH调到3左右，磷酸浓度0.1mol/L就能让不同氨基酸的保留时间相差2倍以上。实验数据表明，当pH超过5时，某些酸性成分会开始分解，而pH低于2又容易让柱子被腐蚀。比如用C18柱分离糖类时，用0.1mol/L磷酸水溶液，分离度能达到1.5以上，而换成0.01mol/L醋酸时分离度只有1.2。酸浓度太低的话，样品在柱子里停留时间太长，容易拖尾；浓度太高的话，柱子寿命会缩短30%以上。所以得找平衡点，既要保证分离效果，又要保护色谱柱。