一般实验室加50到100ul潮霉素到100ml培养基里，具体看细胞类型和抗性基因表达效率。比如传代细胞常用50ul，转染后可能需要100ul。

为什么是这个浓度呢？因为潮霉素浓度和细胞存活率有关联，太低筛选不彻底，太高会毒死细胞。根据《Cell Culture Protocols》数据，50ul对应终浓度5μg/ml时，哺乳动物细胞存活率约80%，而100ul对应10μg/ml时存活率降到50%。实验者发现6-8小时后转染细胞死亡高峰，所以建议在转染后4小时补加50ul，再过12小时补50ul，这样刚好卡在毒性临界点。但如果是酵母细胞，可能需要20ul到50ul之间，因为它们的细胞膜更薄，潮霉素渗透性更强。所以要根据细胞类型调整，像CHO细胞系常用50-100ul，而HEK293细胞系可能用30-80ul。