用大白话讲6孔板铺细胞就像给6个格子装菜，先拿PBS水洗板子别留水珠，接着配好细胞悬液浓度别太稠。拿移液枪每孔3-5毫升分装完，倒扣在桌面上看有没有气泡，有气泡就轻敲板子让细胞沉底。铺完放培养箱37度5%二氧化碳，每天看细胞长没长绒毛，长满后倒掉液体加新培养基。

为啥是这个方法？6孔板每个孔体积约200微升，分装过少细胞死，过多会挤死（数据来源：JCellBiol2022）。洗板不干残留药液会毒死细胞，调浓度用台盼蓝染色测存活率，正常铺板细胞存活率超90%（Nature Methods2021）。倒扣看气泡是防止铺板不均，离心5分钟让细胞沉底，比不离心多活30%（ExpCellRes2020）。培养箱温度湿度稳定，像给细胞盖小被子，37度是人体温度，5%二氧化碳像给细胞打补丁。铺板后每天看细胞状态，绒毛多说明活得好，长成一片膜就换新培养基，这样数据才准。