2025-11-09 00:01:55
B值就是浓度和吸光度之间的比例系数。比如测了100ng、200ng、300ng的BSA溶液,分别测出吸光度是0.2、0.4、0.6,这时候B值就是0.002。简单说就是每增加1ng浓度,吸光度涨0.002。标定的时候用这份数据画条直线,这条直线的斜率就是B值,这样就能算出未知样品的浓度了。
为什么是这个答案呢?因为实验数据证明浓度和吸光度是线性关系。比如100ng对应0.2,200ng对应0.4,这时候B值计算公式是0.2除以100等于0.002。接着300ng吸光度0.6,同样0.6减0.4等于0.2,再除以100还是0.002。这说明不管浓度怎么变,每增加1ng吸光度都涨0.002。所以标定的时候必须测至少5个不同浓度的样本,算出平均B值。比如测了0.1μg、0.5μg、1μg、2μg、5μg的样本,吸光度分别是0.02、0.1、0.2、0.4、1.0,这时候B值就是0.02除以0.1等于0.2。不过要注意单位换算,比如浓度用μg的话,B值单位就是吸光度/μg。所以标定的时候先测数据,算出B值,再代入未知样品的吸光度就能算出浓度了。
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