配Hank液先称NaCl7.4克，KCl0.2克，CaCl20.1克，MgCl20.1克，Na2HPO40.1克，NaHCO32.2克，葡萄糖5.6克，加500毫升蒸馏水，搅拌至溶，再加蒸馏水到1升，煮沸灭菌备用。

这个配方是细胞培养常用的基础液，因为NaCl和KCl能维持细胞渗透压和膜电位，CaCl2和MgCl2是细胞骨架的必需元素，Na2HPO4和NaHCO3组合能稳定pH值在7.4左右。根据《细胞培养技术》第3版数据，葡萄糖浓度5.6g/L刚好满足贴壁细胞能量需求，灭菌时用121℃高压锅处理30分钟，能有效灭活支原体等微生物。实际操作中如果忘记加CaCl2，细胞会因胞膜结构破坏而大量死亡，实验显示添加不足0.1g/L的Ca²+会使贴壁率下降40%以上。