HEPES缓冲液主要是用来调溶液的酸碱度，让细胞在实验里不乱跑。它就像个pH小管家，能保持培养液在7.5左右的弱碱性环境。很多细胞喜欢这种环境，比如贴壁细胞、免疫细胞，要是pH乱套了，细胞就死得快。实验室里配培养基、洗细胞、做转染都用得上，特别是做细胞实验前，得先用它调好pH，不然细胞活不过两小时。

为啥得用HEPES缓冲液呢？首先它有个好用的pKa值7.5，跟细胞内环境接近，调pH时波动小。数据说在37℃时，pH变化±0.5需要加0.1M HEPES，比磷酸盐缓冲液少一半用量。而且它不跟细胞膜上的蛋白质结合，不会把细胞壁戳破。文献里提到，用HEPES的培养基里，HeLa细胞传代次数比普通培养基多3次，存活率还高15%。实验室老手都懂，要是用磷酸盐缓冲液，细胞贴壁率能掉到40%，而HEPES能稳在75%以上。温度变化时，HEPES的缓冲能力比其他缓冲液强，特别是在4℃低温实验里，别的缓冲液容易失效，它还能撑着。所以现在做细胞实验，基本都改用HEPES了，成本也不贵，一升才几十块。