HPLC测乳酸分三步走，第一步进样，把样品和试剂一起泵进机器，然后通过色谱柱。色谱柱像筛子，把乳酸和其他成分分开。用检测器算出乳酸含量。整个过程只要半小时，比传统方法快三倍。

为什么这样操作？首先色谱柱选C18的，因为这种柱子对乳酸分离效果最好，实验数据证明保留时间稳定在8.2分钟±0.3分钟。流动相用磷酸盐缓冲液，pH调到3左右，这样乳酸和其他物质不会互相干扰。检测器用紫外型，乳酸在254nm波长有强吸收，峰面积和浓度直接挂钩。标准曲线算出来R²是0.999，误差不超过2%。但要注意样品预处理，比如用0.22微米滤膜过滤，避免堵塞柱子。有人测试过，不过滤的话出峰时间推迟4分钟，峰高降低15%。还有个常见坑，流动相流速别超1.5ml/min，不然分离度会从1.8降到1.2，数据就废了。