1. 先把冻存液和细胞混在一起，装进小管子

2. 用液氮罐盖住管子，快速倒进液氮罐里

3. 每次冻存前要离心一下，让细胞沉到底部

4. 冻存好的细胞要放在-80度冰箱里，别超过一年

为什么这样做呢？因为液氮温度极低，直接接触会冻伤细胞。先加冻存液是为了让细胞慢慢结冰，减少冰晶破坏细胞膜。有研究显示正确操作存活率能到95%以上，错误操作可能只剩30%。离心这一步能让细胞团块更紧密，避免冻存时散开。液氮罐倒管子要快，因为液氮会挥发，存的时间长了效果差。-80度冰箱比普通冰箱好，但别存太久，细胞会老化。数据来源：《细胞培养技术手册》2022版和《生物医学实验室操作规范》2021版。