2025-11-09 00:05:01
考马斯亮蓝快染色法就是往蛋白样品里加蓝染料,让蛋白变蓝再离心分离。具体步骤是先把样品和缓冲液按比例混匀,静置两三分钟让染料和蛋白结合,接着用离心机转五分钟,蓝颜色就集中在管底了。这种方法省事又快,适合新手用。
为啥是这个办法呢?因为考马斯亮蓝和蛋白质结合后会产生颜色变化,像数据说浓度0.1mol/L的缓冲液能结合80%的蛋白。染色两分钟足够让大部分蛋白被染色,超过时间反而浪费。离心五分钟足够让沉淀到底部,再久反而可能破坏蛋白结构。比如有实验对比过,用这个方法比传统法快30%,而且上样量少一半还能看清条带。不过要注意离心速度不能太高,一般12000转/分就行,太高会把蛋白压碎。
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