脂蛋白纯化分三步走：先离心分层，密度梯度柱进一步分离不同密度脂蛋白，用脱盐柱去掉盐分。比如乳糜微粒密度最低沉到底部，HDL密度最高浮在上面。亲和层析柱专门抓特定脂蛋白，比如用抗体绑住LDL。每步都配缓冲液控制pH和离子浓度，防止蛋白变性。

为什么这么操作呢？脂蛋白密度差异是关键，实验数据显示乳糜微粒密度1.006-1.019g/cm³，HDL高达1.035-1.063g/cm³，密度梯度柱利用这个特性分层。亲和层析效率超90%，比如抗LDL抗体结合率92.3%（来源：《生物化学技术手册》2021）。脱盐柱用离子交换树脂，洗脱时盐分带走了杂质蛋白，纯度从30%提到98%。离心速度和时间也讲究，比如3000转/分离心15分钟才能分层彻底。