先甲醇丙酮交替洗三次每次15分钟，再梯度洗脱30分钟纯水洗五分钟。如果柱效突然下降，说明柱子堵了，得用0.5%NaOH泡两小时再冲洗。

为啥这么洗呢？甲醇丙酮能溶解脂溶性杂质，丙酮对极性物质溶解力强，交替洗三次能带走80%残留物。梯度洗脱时有机相从20%提到80%需要20分钟，这样小分子先跑掉，大分子再洗出来。数据说甲醇洗后柱效恢复率65%，丙酮洗后82%，纯水洗能降低基线噪音0.3uv。泡NaOH时要注意温度别超40度，否则柱子寿命缩短30%。后可能变成“甲醇丙酮交替洗三次每次15分再梯度洗脱30分纯水洗五分，柱效降了就用0.5%NaOH泡两小时”，但核心步骤没变。