细胞爬片加多少要看细胞类型和实验目的，一般2000到5000个细胞就行，如果细胞贴壁差可能需要更多。固定不是必须的，但要看后续实验，比如要观察细胞结构可能需要固定，如果研究活细胞代谢就不需要固定。

为什么是这个答案呢，因为文献说3D细胞模型常用3000到8000个细胞，固定步骤影响结果，比如免疫组化需要固定，而活细胞实验不需要固定，这样数据更准确。固定剂比如多聚甲醛会让细胞膜收缩，但时间太长会失活，所以有的实验固定15分钟，有的不固定。比如《细胞培养技术手册》提到，贴壁细胞爬片2000-5000个足够传代，悬浮细胞可能需要5000-10000个，固定前先让细胞贴好底板，否则掉下来影响计数。