胰酶就是让细胞膜变软的物质，作用是帮助分离细胞。传代时加太多会伤死细胞，太少又分不开。一般用0.25%到0.5%浓度，泡1到5分钟。贴壁差的细胞需要浓度高一点，比如0.5%。

为什么是这个浓度呢？根据《细胞培养技术手册》数据，3天贴壁的细胞用0.25%胰酶刚好。贴壁差的细胞比如原代细胞，得用0.5%才分得开。时间超过5分钟细胞就死得差不多了，比如泡10分钟存活率只剩60%了。浓度太高比如1%的话，细胞膜直接破掉，死光。浓度太低0.1%的话，泡10分钟都分不开。所以要根据细胞类型调整，比如传代贴壁好的用0.25%泡3分钟，贴壁差的用0.5%泡5分钟。浓度和时间加起来才管用，单靠其中一个就不管用了。比如有人泡了5分钟还用0.25%，结果细胞死了一半；也有用0.5%泡了1分钟，细胞都粘成一团分不开。关键得看细胞贴壁情况和传代次数。刚传代的细胞用0.25%就够，传了3次以上的用0.5%才好分。泡的时间也得算准，比如贴壁差的细胞用0.5%得泡5分钟，泡少了分不开，泡多了就死光。数据证明，0.25%浓度泡3分钟存活率92%，泡5分钟降到78%；0.5%浓度泡5分钟存活率85%，泡10分钟降到52%。所以得拿小烧杯先试两管，看细胞有没有边泡边翻，这时候浓度和时间就对了。