2025-11-09 00:05:47
组织蛋白WB的上样量就是往电泳凝胶里加多少蛋白样品。一般每次实验加20-50微克,就像煮面放多少面粉一样,放太多会糊锅,太少就煮不成面。这个量要算着来,蛋白浓度高的细胞裂解液可能一次加30微克,浓度低的得加到50微克才能让条带看得清。
为什么是这个答案?因为细胞裂解液通常含100-200微克蛋白/毫升,跑胶时间1-2小时,20-50微克刚好让条带在凝胶中间显色。比如《分子克隆》第三版提到,上样量超过100微克会导致条带过宽,影响判断。所以要根据蛋白浓度调整,比如浓度高的减半,浓度低的加倍。实验员老王有次加70微克结果条带堆在一起,后来改用30微克才正常。跑胶时条带太宽像叠罗汉,太窄像隔水看月亮,得找中间值才好。
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