细胞培养后期pH下降，就是说培养瓶里的酸味变浓了。细胞在分裂的时候会吃掉很多氧气，同时吐出很多二氧化碳和乳酸。这些酸性的东西混在水里，就像泡面汤里加两勺醋，pH值自然就往下降了。比如培养三天的小鼠成纤维细胞，pH从7.2降到6.8，这时候细胞可能会皱巴巴的，像被酸泡过的虾子。

为什么会出现这种情况呢？主要有两个原因。首先细胞在后期会饿得快，氧气不够就转吃糖类，糖不完全分解就会变成乳酸和二氧化碳。比如实验数据显示，当乳酸浓度超过30mmol/L时，pH每降0.1，细胞存活率就掉5%左右。其次培养液没及时更换，就像长时间泡菜坛子，酸味越攒越浓。有研究说二氧化碳浓度每升高1mmol/L，pH就下降0.03，相当于每加1个二氧化碳分子，pH就少0.0003。这时候得赶紧换液或者加碱性物质中和。比如某实验室用5mmol/L的碳酸氢钠，把pH从6.5调回7.0，细胞贴壁率从60%升到85%。