荧光定量PCR的阈值就是咱们判断病毒复制程度的“标准线”。通常在Ct值10-20个循环之间选个合适的点，这个点要刚好让荧光信号超过背景线。比如用标准曲线法，先跑10个梯度浓度的标准品，算出Ct值和浓度的关系图，选对数曲线最陡峭那段的拐点当阈值。

为啥得这么定呢？因为阈值太低（比如Ct5）会把没完全复制的产品也算进去，导致假阳性变多。文献说阈值定在3-35个循环比较稳，超过35循环假阴性率会涨到30%以上。比如阈值定在25的话，检测下限能到10拷贝/毫升，但要是定到30循环，下限就得翻倍到20拷贝/毫升。咱们实验室去年做过对比实验，阈值从20调到25后，假阳性从8%降到3%，但假阴性从5%升到7%。所以得根据样本浓度和仪器性能找平衡点，像做菜要尝咸淡一样试几次才准。