蛋白电泳需要试剂有上样缓冲液SDS-PAGE凝胶转移缓冲液电泳缓冲液显色试剂这些试剂各司其职比如上样缓冲液帮助稳定蛋白质SDS-PAGE凝胶负责分离不同大小的蛋白质转移缓冲液让蛋白质从凝胶跑到膜上显色试剂显示条带位置。注意事项包括样本不能太粘稠电压不能太高否则条带会模糊转移时间要够否则条带会缺失电泳时别让膜泡水影响显色。

为什么需要这些试剂呢首先上样缓冲液能让蛋白质在电泳过程中保持稳定防止变性SDS-PAGE凝胶中的SDS和聚丙烯酰胺能让蛋白质带负电从而在电场中分离不同大小的条带比如用80-120V电压电泳30分钟条带比较清晰转移缓冲液含有低浓度盐分让蛋白质从凝胶转移到膜上如果转移时间不够比如少于30分钟条带会缺失数据表明转移时间每减少10分钟条带清晰度下降20%显色试剂用考马斯亮蓝R-250染色后能清晰看到5-200KD的蛋白条带。比如实验显示电压超过120V会使条带变宽30%以上而电压低于80V会导致分离不充分。同时样本粘稠度超过1:10会降低上样效率导致条带模糊。这些试剂和注意事项的设置都是基于蛋白质分子量分布和电泳迁移率原理推导出来的科学结论。