蛋白等电点就是蛋白质在溶液中带电刚好平衡时的酸碱度数值。想算这个得先知道蛋白质由哪些氨基酸组成，每个氨基酸都有酸碱基团，比如带电的氨基和羧基。这些基团在不同酸碱度下会放电或吸电，等电点时整个蛋白质的正负电荷刚好抵消。查网站输入氨基酸种类和数量，系统就能算出这个平衡点的pH值。比如输入血红蛋白的20种氨基酸数据，网站就能显示它的等电点大约是7.0左右。

为什么得用氨基酸的酸碱特性来算呢？因为每个氨基酸的酸碱基团都有固定解离数值，比如组氨酸的pKa是9.2，当溶液pH等于这个值时，这个基团会带正电。当所有氨基酸的带电状态加起来总电荷为零时，对应的pH就是等电点。比如亮氨酸的羧基pKa是2.6，在pH2.6时会放电，而赖氨酸的氨基pKa是10.5，在pH10.5时吸电。系统通过计算所有氨基酸在不同pH下的电荷总和，找到总和为零的临界点。实验数据显示，牛胰岛素的等电点正好是5.3，和理论计算完全吻合。所以查网站其实就是把复杂的数学计算变成填表操作，输入氨基酸种类和数量，网站后台自动跑完所有解离状态的叠加计算。