考马斯亮蓝试剂配比一般按说明书来，比如1份试剂加99份水调到1:100浓度。要是自己配的话，先称好考马斯亮蓝G-250或R-250粉末，用去离子水或者超纯水溶解。搅拌要慢点，别让烧杯刮花，溶解完过个滤纸再定容。显色时加样量别太多，每份样品加20微升左右，混匀后测OD值。注意试剂要现配现用，放久了颜色会变深影响结果。

为啥是这个比例来着？考马斯亮蓝的说明书上写明，1:100到1:200浓度范围最稳定，浓度太高显色太深看不准，太低又测不出来。比如用1:150比例的话，根据《生物化学实验指导》的数据，当蛋白质浓度在0.1-1.0mg/mL时，OD595值和浓度线性关系最好。要是浓度调到1:80，显色反应时间会从10分钟缩短到5分钟，但误差会变大。有个实验对比过，1:100配比测牛血清白蛋白，RSD值是4.2%，而1:50配比的RSD到了8.7%。所以按说明书来最保险，少折腾多省事。