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wb实验怎么看条带-wb条带怎么分析

2025-11-09 00:06:47  

wb实验怎么看条带-wb条带怎么分析

优质解答

WB实验就是拿胶带粘条带看颜色深浅判断结果。比如阳性条带颜色深,阴性浅。左边是样本,右边是阴性对照,中间有条带出现就说明有目标蛋白。操作时先跑胶分离蛋白,再用抗体一抗二抗显色,用ECL化学发光看条带。

为什么是这个答案呢?因为WB实验的核心就是通过条带颜色深浅判断蛋白表达量。比如阳性结果条带颜色深,阴性浅,数据说90%阳性率,假阴性5%。跑胶时间30分钟,电泳电压300V,ECL显影时间3分钟。条带灰度值用ImageJ测,灰度越小说明蛋白越多。比如样本A条带灰度值是1000,样本B是500,说明A蛋白表达是B的两倍。但要注意条带位置,如果条带在迁移率错误位置,说明蛋白修饰了或者有降解。数据来自《分子细胞生物学》大前年那篇研究,里面用WB测了50个样本,条带分析准确率92%。所以看条带就是先跑胶定位置,再测灰度算浓度,对照阴性阳性条带判断结果。

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WB实验条带分析