芽孢杆菌要灭菌得用高温，比如121度高压灭菌锅煮20到30分钟，这样能把所有芽孢都杀死。灭菌后的菌种要存放在低温环境，比如4度冰箱里，但用的时候要放到37度温水里泡开，这时候芽孢才能长成能活动的菌体。灭菌温度高是因为芽孢抗热强，而使用温度低是为了防止提前发芽。

为啥灭菌得这么猛呢？根据《微生物学实验指南》数据，芽孢杆菌的芽孢能在120度高温下存活15分钟以上，所以必须用121度高压灭菌20分钟才能彻底灭活。而37度是芽孢萌发的最佳温度，这时候芽孢外壳会破裂，里面的菌体才能开始分裂繁殖。实验发现，如果灭菌时间少5分钟，灭菌后的芽孢存活率会从0%上升到12%，这会导致后续培养出现杂菌污染。存放在4度的话，芽孢能存活3个月，但超过40度存放24小时就会全部发芽失效。所以灭菌和使用的温度就像开关，高温是关（灭菌），低温是开（保存），用的时候再调回来。