荧光定量PCR做散点图就三步走。第一步准备样本，把待测的样本和对照品分别上样。第二步设置阈值，通常选Ct值15的位置画横线。第三步用软件把荧光信号和Ct值连起来画图，正常的话点子应该集中在阈值以下，像撒芝麻似的分布均匀。

为什么得这样做呢？因为阈值就像给反应定闹钟，超过这个时间还没起反应的就算阴性。根据文献数据，阈值设在Ct值15时，能同时保证灵敏度和特异性，假阳性率控制在5%以内。比如做100个样本，正确识别出95个有效数据，5个异常点，这样散点图才能看出真实情况。软件自动连点的时候，如果点子太稀疏或者连成直线，说明可能有污染或者试剂问题。要记住阈值不能随便调，调高了会漏检，调低了会误判。每次做完先看散点图，像看健康码一样判断有没有异常。