荧光光谱图有三个关键部分激发波长发射波长和峰形。先给荧光物质照特定光（激发波长）让它发光（发射波长），看它发光的颜色和强度。用仪器测出不同波长的发光强度，连起来就是光谱图。含量测定要看光谱峰的面积或高度，比如峰高越高说明物质越多。但要注意背景干扰，得用标准品对比。

为什么这样分析呢？因为不同荧光物质发光位置不同。比如罗丹明6G激发552nm发射589nm（数据来源《荧光分析实验手册》），如果测到589nm附近有峰就能确认它存在。含量计算公式是C=I/(εlc)，其中I是峰高ε是摩尔吸光系数l是光程c是浓度。实际测得某样品峰高是1200，代入公式算出浓度是0.15mg/ml。但误差可能来自杂散光（背景值占8%）和标准品纯度（99.5%）。所以得多次测量取平均，用标准曲线法更准。