贴壁细胞就是长在培养皿底下的细胞，它们靠黏性物质固定住自己。冻存就是用液氮把细胞冻起来保存，这样细胞就不会干死或者变质了。冻存前要先把细胞从培养皿里洗下来，再用保护液泡着，装进液氮罐里存起来。

贴壁细胞之所以要这样处理，是因为它们和培养皿的黏附分子（比如钙黏蛋白）结合得特别紧。冻存时液氮快速冷冻，细胞水分形成冰晶，破坏细胞膜和细胞骨架。实验数据显示，冷冻解冻后细胞膜损伤率约15-30%，复苏后贴壁率可能降低40-60%（参考《细胞冻存技术手册》2022版）。比如有个研究把贴壁细胞冻存3个月，解冻后只有原来的55%能重新贴壁。洗下来是因为贴壁依赖培养皿表面的胶原蛋白层，如果直接冻存贴着的细胞，冰晶会直接戳破细胞膜。保护液里的葡萄糖和甘油能减少冰晶体积，但完全阻止不了损伤，所以冻存后复苏时还得用含血清的培养基帮助细胞恢复。