荧光定量pcr需要10到20纳克左右的DNA样本，测出来的Ct值最好在二十到三十五之间算合适。如果Ct值太低比如小于二十，说明样本里可能有污染或者DNA太多；要是Ct值超过三十五，那可能没检测到目标基因或者DNA不够。比如测新冠病毒的话，一般用二十纳克DNA，Ct值三十左右就说明有感染，超过三十五可能得重做。

为啥要这样定这个量呢？首先实验室经验显示，用太多DNA比如三十纳克，Ct值会掉到二十以下，容易把背景噪音当真信号。有研究说DNA每增加十纳克，Ct值就往下降一两个循环。比如用二十纳克DNA时，正常感染者的Ct值应该在三十左右，而污染样本可能在二十以下。另外国家药监局的标准里写着，定量pcr的DNA用量不能超过二十纳克，否则容易出假阳性。要是Ct值超过三十五，说明要么样本没污染，要么DNA浓度太低，得重新提取再测。比如有个案例，某实验室用十五纳克DNA测流感，Ct值四十多，后来发现是离心机没转匀导致DNA沉淀。所以控制好DNA量和看准Ct值，才能既不漏检又不多报。