今天看这个蓝白斑筛选的图片有点懵，得好好理清楚步骤。首先把细菌涂布在琼脂平板上，等长出小点点菌落了，再在表面滴几滴IPTG和X-Gal的混合液。过两天观察，蓝色的是阳性的，白色的是阴性的。比如用质粒有抗生素抗性的话，白色菌落可能没带质粒，所以不长抗生素。

为什么是这个步骤呢？因为IPTG是诱导剂，能让细菌把质粒里的报告基因启动。X-Gal是显色剂，遇到β-半乳糖苷酶会变蓝。这个酶正好是IPTG激活的。根据文献数据，大肠杆菌转化时大概60-70%的菌落会变蓝，30-40%保持白色。比如用pUC19质粒的话，阳性率在65%左右。要是看到大片蓝色，可能IPTG浓度太高了，得调到0.1-0.5ml/皿的量。还有个注意点，加药后要倒置平板，避免局部浓度过高烧死细菌。上次我试过把药直接点在菌落上，结果周围都变蓝了，可能药液没混匀。现在都是用打孔器均匀涂布药液，效果稳定多了。