蛋白SDS电泳上样量别太多也别太少，一般选5到20微克合适。少于5微克条带显影太弱，超过20微克条带会出不去还重叠。比如我上次测细胞裂解液，5微克条带灰蒙蒙的，20微克直接压到下一行，跑胶时间得延长半小时。

为啥是这个量呢？因为蛋白在SDS缓冲液里会变细长，5微克以下显影信号不够强，凝胶成像仪照出来像雾一样。实验发现10微克条带最清晰，比如测肌肉蛋白，10微克跑完刚好在第二道，灰度值稳定在2000左右。超过15微克条带会挤到下一道，比如20微克跑出来的肌动蛋白条带和下一道GAPDH重叠了。但别太省，3微克条带灰度值不到1000，显微镜下根本看不见。所以得找平衡点，5到20微克正好是条带清晰又跑得动的范围。上次测肝组织，用15微克上样，跑两小时条带分得清，灰度值稳定在1800-2200之间，拍照效果最好。